100 čistých astaxantínusa nachádza v morských organizmoch, ako sú mikro riasy (haematococcus pluvialis), losos, pstruh, krill a krevety. Nárast v popularite v rámci odvetvia nutraceutických, kozmetických, akvakultúrnych a potravinárskych a nápojových odvetví je poháňaný rozsiahlym výskumom, ktorý zdôrazňuje jeho výhody, ktoré prekonávajú prínosy mnohých ďalších antioxidantov, ako je vitamín E a - karotén. Medzi tieto výhody patrí boj proti oxidačnému stresu, zníženie zápalu, zvýšenie zdravia pokožky, zvyšovanie vytrvalosti a podporu zdravia očí. Účinnosť, bezpečnosť a trhová hodnota veľkých výrobkov z astaxantínu sú však vnútorne spojené s ich kvalitou, čistotou a koncentráciou. Ale ako otestovať astaxanthin?
Dôležitosť testovania astaxantínu
Globálny trh s astaxantínmi sa rýchlo rozširuje a predpokladá sa, že v nasledujúcich rokoch dosiahne miliardy dolárov. Tento rast je sprevádzaný rozmanitým rozsahom 100 čistých produktov astaxantínu: syntetické verzus prírodné, olejové - suspenzie, práškové extrakty, softgély a topické krémy. Táto rozmanitosť predstavuje významné výzvy:
• Overenie účinnosti:
Poskytuje produkt inzerovanú dávku astaxantínu?
• Posúdenie čistoty:
Je prírodný astaxantín bez škodlivých rozpúšťadiel, ťažkých kovov, pesticídov a mikrobiálnych kontaminantov?
• Identifikácia stereoizomérov:
Prírodný astaxantín z Haematococcus pluvialis je takmer výlučne v biologickejšej dostupnej 3S, enantiomérnej forme 3. Syntetický astaxantín, produkovaný z petrochemikálií, je zmesou troch stereoizomérov (3S, 3, 3R, 3 a 3R, 3'R) a všeobecne sa považuje za nižšiu biologickú aktivitu. Rozlišovanie medzi nimi je rozhodujúce.
• Monitorovanie stability:
100 čistých astaxantínu je vysoko citlivý na degradáciu kyslíka, svetla a tepla. Testovanie zaisťuje, že produkt zostáva v jeho trvanlivosti silný.
• Autenticita a falšovanie:
Nižšie - Syntetický astaxantín alebo iné pigmenty sa môžu použiť na falšovanie drahších prírodných produktov. Na zistenie tohto podvodu je potrebné sofistikované testovanie.
Preto je protokol testovania s viacerými - nevyhnutný pre 100 čistých výrobcov ataxantínu, dodávateľov a koncov {{}}, aby zaručili, že pracujú so skutočným, silným a bezpečným produktom. Dodávatelia, ako je Guanjie Biotech, ako špecializovaný hromadný výrobca astaxantínov, implementujú tieto testovacie protokoly v každej fáze, od surovej biomasy po hotový extrakt, aby sa zabezpečila integrita produktu.
AkoSkúška Astaxantin?
Spektrofotometria
• Princíp:
Toto je klasická, rýchla a náklady - účinná metóda založená na absorpcii svetla pri špecifických vlnových dĺžkach . 100 Pure Astaxantin má charakteristické absorpčné maximum v rôznych rozpúšťadlách (napr. ~ 470-480 nm v acetóne, chloroforme alebo etanole).
• Metóda:
Vzorka 100 čistej astaxantínu sa rozpustí vo vhodnom rozpúšťadle a absorbancia sa meria pomocou UV - vis spektrofotometra. Koncentrácia sa vypočíta pomocou piva - Lambertov zákon (a=εcl), pričom sa spolieha na vopred určený koeficient molárneho vyhynutia pre astaxantín (napr.1%1 cm≈ 2100 v etanole pri ~ 480 nm).
• Aplikácia:
Najlepšie sa hodí pre rýchle a hrubé odhady celkového obsahu karotenoidov v surovej biomase, riasovej paste alebo koncentrovaných olejoch. Na monitorovanie procesov sa široko používa v dome -.
• Obmedzenia:
Chýba mu špecifickosť. Meria celkové chromofory (farebné zlúčeniny) a nedokáže rozlišovať medzi astaxantínom, jeho estery, inými karotenoidmi (napríklad canthaxantín alebo - karotén) alebo degradačnými produktmi. Nie je prijateľné pre certifikáciu konečného produktu, ak je potrebná presná kvantifikácia.
High - Performance Liquid Chromatography (HPLC)
HPLC je jednoznačná metóda voľby na presnú identifikáciu, separáciu a kvantifikáciu 100 čistých astaxantínu a jeho rôzne formy.
• Princíp:
HPLC oddeľuje komplexnú zmes zlúčenín vo vzorke na základe ich diferenciálneho rozdelenia medzi stacionárnou fázou (stĺpec) a mobilnou fázou (rozpúšťadlo). Oddelené zlúčeniny sa potom detegujú a kvantifikujú, zvyčajne s použitím detektora fotodiódy (PDA).
• Kľúčové konfigurácie HPLC pre Astaxanthin:
Reverzné - fáza hplc (rp - hplc): Toto je najbežnejšie nastavenie. Používa sa non - polárna stacionárna fáza (napr. C18) a polárna mobilná fáza (napr. Metanol, acetonitril, voda, často s modifikátormi ako etylacetát alebo dichlórmetán). Výborne oddeľuje astaxantín od svojich esterov (monoesters elute pred diermi) a od iných karotenoidov.
• Chiral HPLC:
Táto špecializovaná technika používa chirálnu stacionárnu fázu navrhnutú na oddelenie enantiomérov. Je to definitívna metóda na rozlíšenie prírodných (3S, 3) 100 čistý astaxantín od syntetickej zmesi (3S, 3, 3R, 3, 3R, 3'R). Toto je kritický test na pravosť.
• Detekcia:
Detektor PDA je životne dôležitý, pretože poskytuje UV - vis spektrum každého píku, ktorý sa eluuje zo stĺpca. Tento spektrálny odtlačok prsta umožňuje pozitívnu identifikáciu porovnaním spektra a retenčného času s autentickým štandardom ataxantínu.
• Kvantifikácia:
Kvantifikácia sa dosiahne integráciou oblastí vrcholu vzorky a ich porovnaním s kalibračnou krivkou vytvorenou z certifikovaných 100 čistých referenčných štandardov astaxantínu pre známu koncentráciu. To umožňuje presné meranie bezplatného astaxantínu, monoestorov a dierov jednotlivo.
Typická metóda HPLC - PDA pre estery Astaxanthin môže použiť:
Stĺpec: C18, 250 x 4,6 mm, 5 μm
Mobilná fáza: Gradient rozpúšťadla A (metanol: voda, 90:10) a rozpúšťadlo B (etylacetát) alebo izokratické metódy s ternárnymi rozpúšťadlami.
Prietok: 1,0 ml/min
Detekcia: 470 nm
Teplota: 25 stupňov
• Príprava vzorky:
Extrakcia je kritický predp - krok k HPLC. Oleje sa môžu zriediť priamo vo vhodnom rozpúšťadle. Sušená biomasa alebo prášky vyžadujú prísnejší proces extrakcie, často s použitím rozpúšťadiel, ako je acetón, etylacetát alebo tetrahydrofurán (THF) s korálkou -, aby rozložili steny bunkových buniek a zabezpečili úplnú extrakciu.
Mass Spectrometry (LC - ms/ms)
• Princíp:
Spojenie HPLC do hmotnostného spektrometra (LC - MS alebo LC - ms/ms) pridáva jedinečnú vrstvu špecifickosti a potvrdenia. Detektor MS identifikuje zlúčeniny založené na ich hmotnosti - na - pomer náboja (m/z).
• Aplikácia:
Potvrdzujúca identifikácia: Poskytuje definitívne potvrdenie molekulovej hmotnosti . 100 Pure Astaxantin má molekulovú hmotnosť 596,8 g/mol. Jeho estery budú vykazovať zodpovedajúcim spôsobom vyššie hmotnosti (napr. Monoester s mastnou kyselinou MW 282 by mal hmotnosť 596.8 + 282 - 18=860.8, čo predstavuje stratu vody počas esterifikácie).
• Zistenie stopových nečistôt:
Vysoko účinný na identifikáciu a kvantifikáciu nízkych hladín iných karotenoidov, degradačných produktov alebo kontaminantov, ktoré by detektor PDA mohol vynechať.
• Štúdie metabolomiky:
Používa sa vo výskume na sledovanie astaxantínu a jeho metabolitov v biologických vzorkách (krv, tkanivá) na štúdium jeho absorpcie, distribúcie a biologickej dostupnosti.
Testovanie na kontaminanty a čistotu
• Zvyškové rozpúšťadlá:
Plynová chromatografia (GC) s detektorom plameňa ionizácie (FID) alebo hmotnostným spektrometrom (MS) sa používa na detekciu a kvantifikáciu prchavých organických rozpúšťadiel (napr. Hexán, etanol, etylacetát) zostávajúca z procesu extrakcie, zabezpečujú<467>).
• Ťažké kovy:
Na testovanie toxických kovov, ako je olovo, arzén, kadmium a ortuť, sa používajú induktívne spojené plazmatickú hmotnostnú spektrometriu (ICP- ms) alebo atómová absorpčná spektroskopia (AAS). Limity sú prísne a často sledujú USP<232>/ ICH Q3D Pokyny.
• Mikrobiologické testovanie:
Štandardné metódy počtu dosiek sa používajú na zabezpečenie 100 čistého produktu astaxantínu v rámci bezpečných limitov pre celkový aeróbny mikrobiálny počet, celkové kvasinky a plesne a neprítomnosť špecifických patogénov, ako sú E. coli, Salmonella a Staphylococcus aureus.
• Pesticídy:
GC - MS alebo LC - MS/MS sa používajú na skríning stoviek potenciálnych zvyškov pesticídov, ktoré sú zvlášť dôležité pre biomasu rias pestovanej v otvorených rybníkoch.
Testovanie stability
Stabilita sa hodnotí pomocou akcelerovaných testovacích protokolov podľa usmernení ICH (Q1A (R2)). Vzorky sa ukladajú v komorách stability za stresovaných podmienok:
• Zvýšená teplota: napr. 40 stupňov ± 2 stupňa
• Vysoká vlhkosť: napr., 75% ± 5% RH
• Vystavenie svetla: podľa ICH Q1B
100 vzoriek čistého astaxantínu sa vytiahne v nastavených intervaloch (0, 1, 2, 3, 6 mesiacov) a testuje sa primárne pomocou HPLC na obsah astaxantínu. Miera degradácie sa analyzuje, aby sa predpovedala trvanlivosť produktu v podmienkach ukladania odporúčaných. To tiež pomáha pri formulovaní stabilných výrobkov s vhodnými antioxidantmi (napr. Vitamín E) a balenia (nepriehľadné, vzduchotesné nádoby).
Záver
Pozoruhodné zdravotné prínosy 100 čistých astaxantínov ho poháňali do popredia výživového a funkčného potravinového priemyslu. Tento sľub však možno splniť iba vtedy, ak je produkt skutočný, silný, čistý a stabilný. Testovanie astaxantínu preto prechody z iba technického postupu na základný pilier integrity produktu a dôvery spotrebiteľov.
Zatiaľ čo jednoduchá spektrofotometria má svoje miesto pre rýchle kontroly, HPLC - PDA je nevyhnutným pracovným koňom na presnú kvantifikáciu a identifikáciu. Chiral HPLC a LC - MS/MS Poskytnite definitívny dôkaz potrebný na autentifikáciu prírodného astaxantínu a detekciu sofistikovanosti. Okrem toho musí komplexný režim kontroly kvality obsahovať testy kontaminantov, ako sú ťažké kovy, rozpúšťadlá a mikróby.
Rozsiahly výskum 100 čistých astaxantínu nielen potvrdzuje jeho biologickú nadradenosť, ale tiež poskytuje vedecký základ pre tieto sofistikované analytické techniky. V konečnom dôsledku zodpovednosť za vykonávanie tohto prísneho testovania klesá na dodávateľov. Renomovaný 100 čisto dodávateľa astaxantínov nie je iba obchodníkom. Je to prírodný výrobca astaxantínov, ktorý vkladá prísne testovanie do celého výrobného potrubia. Guanjie Biotech je dodávateľom Astaxanthin. Náš proces vkladá prísne testovanie v každej fáze: od kultivácie čistého kmeňov hematococcus pluvialis po - monitorovanie procesu a konečnú extrakciu. Každá šarža hotového hromadného produktu astaxantínu prechádza úplnou batériou analýz vrátane HPLC - PDA pre účinnosť, GC pre rozpúšťadlá, ICP - MS pre ťažké kovy a mikrobiologické testy. Tento záväzok, zdokumentovaný v podrobnom osvedčení o analýze (COA), zaručuje zákazníkom produkt, ktorý je silný, autentický, bezpečný a stabilný.
Odkazy
[1] Capelli, B., Bagshaw, J., & Cysewski, Gr (2013). Syntetický verzus prírodný astaxantín: prehľad biologickej dostupnosti a účinnosti. Cyanotech Corporation.
[2] Fassett, RG a Coombes, JS (2011). Astaxantín: Potenciálne terapeutické činidlo pri kardiovaskulárnych ochoreniach. Morské lieky, 9 (3), 447–465.
[3] Hosseini, SM, Hashemi Gahruie, H., Razmjooie, M., a kol. (2020). Vplyv podmienok skladovania na stabilitu nanolipozómov astaxantínu. Journal of Food Science and Technology, 57 (4), 1425–1434.
[4] Medzinárodná konferencia o harmonizácii (ICH). (2003). Testovanie stability nových liekových látok a produktov (Q1A (R2)).
[5] Medzinárodná konferencia o harmonizácii (ICH). (2005). Nečistoty: usmernenie pre zvyškové rozpúšťadlá (Q3C (R6)).
[6] Nishida, Y., Yamashita, E., & Miki, W. (2007). Kladenie aktivít bežných hydrofilných a lipofilných antioxidantov proti singletovým kyslíkom pomocou systému detekcie chemiluminiscencie. Carotenoid Science, 11, 16-20.
[7] Turcato, A., Gianoncelli, A., & Ribaudo, G. (2022). Analytické stratégie na hodnotenie astaxantínu a jeho derivátov v komerčných výrobkoch. Molekuly, 27 (15), 4794.
[8] Spojené štáty Pharmacopeia (USP). (2022).<467>Zvyškové rozpúšťadlá. Pharmaceiálny dohovor Spojených štátov.
[9] Spojené štáty Pharmacopeia (USP). (2022).<232>Elementárne nečistoty - limit. Pharmaceiálny dohovor Spojených štátov.
[10] Yuan, JP, Peng, J., Yin, K., & Wang, JH (2011). Potenciálne zdravie - Propagujúce účinky astaxantínu: vysoký - karotenoid hodnoty väčšinou z mikro rias. Molecular Nutrition & Food Research, 55 (1), 150–165.
